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基因工程藥物的分離純化技術(shù)

2016-11-02 來(lái)源:食品藥品學(xué)習網(wǎng)  標簽: 掌上醫生 喝茶減肥 一天瘦一斤 安全減肥 cps聯(lián)盟 美容護膚
摘要:經(jīng)過(guò)破碎和分離之后,目的產(chǎn)物仍然存在著(zhù)大量的雜質(zhì),雜蛋白質(zhì)、類(lèi)似蛋白質(zhì)的異構體,為了獲得合格的目的產(chǎn)物,必須進(jìn)行純化操作。

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  1、目的產(chǎn)物在初始物料中含量很低。

  2、初始產(chǎn)物的組成十分復雜。除了目的蛋白質(zhì)之外,還含有殘余細胞、代謝產(chǎn)物、殘余培養基、各種無(wú)機鹽。

  3、目的蛋白質(zhì)的穩定性很差,容易失活、變性,對于溫度、PH、金屬離子、有機溶劑十分敏感和脆弱。

  4、目的蛋白質(zhì)的種類(lèi)繁多,存在著(zhù)大小不同的片段。

  5、純度不高、常常含有雜菌、熱原等等物質(zhì)。

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 ?。ǘ┓蛛x純化技術(shù)的重要性

  l為了獲得高純度、可供藥用有生物活性蛋白質(zhì),必須對基因工程藥物進(jìn)行一定的分離和純化。

  l1、分離----以大腸桿菌為宿主的基因工程藥物多為胞內產(chǎn)物,分離提取這類(lèi)產(chǎn)物時(shí),需要經(jīng)過(guò)細胞收集、細胞破碎、細胞碎片分離的過(guò)程。

  l2、純化----經(jīng)過(guò)破碎和分離之后,目的產(chǎn)物仍然存在著(zhù)大量的雜質(zhì),雜蛋白質(zhì)、類(lèi)似蛋白質(zhì)的異構體,為了獲得合格的目的產(chǎn)物,必須進(jìn)行純化操作。

  l3、精制----非蛋白質(zhì)類(lèi)純質(zhì)在經(jīng)過(guò)純化操作之后,仍然無(wú)法除去,需要進(jìn)行滅菌和精制操作。

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  分離純化的基本方法

  l1、細胞收集----離心法。

  l2、細胞破碎:

 ?。?)機械破碎法----高壓勻漿法、超聲波破碎法、高速珠磨法、高壓擠壓法、

 ?。?)非機械破碎法----酶溶法、化學(xué)滲透法、熱處理法、滲透壓沖擊法。

  l3、固液分離----離心法、膜過(guò)濾法、雙水相分配萃取法。

  l4、純化色譜技術(shù)----離子交換色譜、疏水色譜、反相色譜、親和色彩譜、凝膠過(guò)濾色譜、高壓液相色譜。

  l5、除非蛋白質(zhì)雜質(zhì)技術(shù)----除DNA、除熱原、除病毒。

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