茶多酚對人皮膚成纖維細胞Nrf2/Bach1mRNA及核蛋白的影響

 

　　不同濃度茶多酚（0、2.5、5、10、20、40mg/L）孵育HSF24h，MTT法檢測細胞增殖活性，篩選出適宜濃度茶多酚，并用該濃度藥物孵育HSF24h，RT?qPCR法檢測Nrf2和Bach1mRNA表達，Western印跡法檢測Nrf2、Bach1核蛋白表達，免疫熒光法檢測Nrf2、Bach1蛋白核分布情況。

 

　　結果顯示，當茶多酚濃度為5mg/L時(shí)，對HSF增殖無(wú)明顯影響，故后續實(shí)驗采用5mg/L茶多酚，對照組濃度為0。HSF加入茶多酚孵育后，Bach1mRNA相對表達量（0.629&plusmn;0.077）及其核蛋白表達（1.424±0.171）均顯著(zhù)低于對照組（0.940±0.033；16.966±1.702），而Nrf2mRNA（1.467±0.076）及其核蛋白表達（6.929±0.121）均顯著(zhù)高于對照組（0.977±0.091；3.537±0.126），差異均有統計學(xué)意義（P<0.05）。免疫熒光結果顯示，Nrf2蛋白在細胞核內的聚集增多，Bach1蛋白在細胞核內聚集減少。提示茶多酚可促進(jìn)Nrf2mRNA、Nrf2核蛋白的表達及核分布，抑制Bach1mRNA、Bach1核蛋白的表達和核分布，從而發(fā)揮抗氧化作用。