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科學(xué)家利用基因編輯技術(shù)治療艾滋病

2018-05-25 來(lái)源:OFweek醫療科技網(wǎng)  標簽: 掌上醫生 喝茶減肥 一天瘦一斤 安全減肥 cps聯(lián)盟 美容護膚
摘要:在共轉染前每個(gè)gRNA都被克隆進(jìn)CRISPRv2慢病毒中,從而創(chuàng )造了慢病毒載體并將之轉導進(jìn)入細胞。和沒(méi)有轉染以及轉染空載體的細胞相比,CRISPR/Cas9轉染穩定表達Tat和Rev的293T和HeLa細胞后,細胞中的這兩個(gè)基因表達都被成功的抑制。

CRISPR/Cas9系統為編輯HIV-1病毒基因組提供了一種新的有潛力的工具。近日來(lái)自日本神戶(hù)大學(xué)醫學(xué)院感染疾病中心及健康科學(xué)研究生院國際衛生系的研究人員設計了一種RNA引導的CRISPR/Cas9以靶向HIV-1調節基因tat和rev,其中的引導RNAs(gRNA)都基于CRISPR的特異性設計,其靶向的序列在6種主要的HIV-1亞型中都保守存在。

在共轉染前每個(gè)gRNA都被克隆進(jìn)CRISPRv2慢病毒中,從而創(chuàng )造了慢病毒載體并將之轉導進(jìn)入細胞。和沒(méi)有轉染以及轉染空載體的細胞相比,CRISPR/Cas9轉染穩定表達Tat和Rev的293T和HeLa細胞后,細胞中的這兩個(gè)基因表達都被成功的抑制。

Tat功能試驗顯示轉染tat-CRISPR顯著(zhù)抑制了HIV-1啟動(dòng)子驅動(dòng)的熒光素酶的表達,而Rev功能試驗則顯示轉染rev-CRISPR后gp120的表達被完全抑制。Cas9剪切位點(diǎn)的靶基因出現高頻的各種程度的突變。值得注意的是,研究人員沒(méi)有檢測到任何非靶標靶位點(diǎn)出現突變,同時(shí)Cas9的表達對細胞的活性沒(méi)有影響。

研究人員進(jìn)一步在HIV-1感染的T細胞系中測試了他們的CRISPR/Cas9系統,結果發(fā)現就算進(jìn)行細胞因子再刺激,p24的表達也被顯著(zhù)抑制,而同時(shí)使用6種gRNAs可以進(jìn)一步增強編輯效率。因此利用CRISPR/Cas9系統靶向HIV-1調節基因也許是一種實(shí)現功能性治愈的有效方法。

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